作者：王 羽，譚 力，蔣曉華，柳曉泉
單位：中國藥科大學藥物代謝與動力學研究中心，南京210009； 南京軍區南京總醫院普通外科研究所，南京210002
【摘要】 目的：觀察短腸綜合征(SBS)大鼠血清遊離脂肪酸水平的變化，評價長鏈甘油三(LCT)和長鏈甘油三酯加中鏈甘油三酯(MCT／LCT，1:1)腸內營養制劑對大鼠血清遊離脂肪酸水平的影響。方法：SD大鼠隨機分為3組(每組7只)：假手術對照組，進行小腸離斷再吻合並給予LCT營養支持；85％腸切除組，進行LCT營養支持；85％腸切除組，MCT／LCT營養支持。14 d後取血清用氣相色譜法測定大鼠血清遊離脂肪酸水平。結果：SBS大鼠血清中總遊離脂肪酸水平以及各遊離脂肪酸水平明顯低于對照組，大多差別具有顯著意義。添加MCT的腸內營養大鼠其血清遊離脂肪酸水平明顯高于僅給予LCT脂肪乳劑的大鼠。結論：添加50％MCT的MCT／LCT腸內營養制劑較單純LCT腸內營養制劑能增加SBS大鼠對脂肪的吸收功能，增加血清遊離脂肪酸水平，而不影響腸道代償能力。
【關鍵詞】短腸綜合征；血清遊離脂肪酸；腸內營養制劑；大鼠；代謝
【中圖分類號】Q493，99；Po77．9 【文獻標識碼】A
【文章編號】1000--5048(2005)o3--0245--05
短腸綜合征是指廣泛小腸切除或曠置術後，殘留的功能性腸管不能維持病人營養需要的吸收不良綜合征[1]。目前，治療短腸綜合征的措施有兩種，一是進行小腸移植，這種方法是治療短腸綜合征的根本措施。然而，小腸移植是目前所有器官移植中難度最大的，尚不能成為治療短腸綜合征的常規措施；再就是進行營養支持，包括腸外營養及腸內營養。而不同配方的營養制劑能否促進殘存小腸代償，促進殘存小腸的消化和吸收，是營養支持研究的熱點。在腸內營養配方中，長鏈甘油三酯(LCT)是一重要營養要素，它可提高血清中必需脂肪酸的水平。但是近來發現中鏈甘油三酯(MCT)的水解速率是長鏈甘油三酯的6倍，它在胃和十二指腸內被脂肪酶分解成甘油和中鏈脂肪酸，具有較好的水溶性[2]，在小腸內可以不經膽汁乳化而被吸收。因此中鏈甘油三酯是否能增加殘存小腸對脂肪的吸收，腸內營養配方中是否能添加中鏈甘油三酯，可以添加多少量等等這都是所需研究的問題。
血清中遊離脂肪酸(FFA)的變化對于機體具有十分重要的意義。盡管FFA在體內的含量極微，但它們是體內某些器官的主要能量來源，其血清中水平直接影響了這些重要器官能量的供給水平，因而，測定血清中遊離脂肪酸的含量能夠在一定程度上反映機體內脂肪酸的代謝變化。
本文對短腸綜合征大鼠給予LCT腸內營養制劑和MCT／LCT(1：1)的混合腸內營養制劑，通過氣相色譜法觀察血清遊離脂肪酸譜的變化，從而探討含有中鏈甘油三酯的腸內營養制劑的作用。
1 材料
1．1 動 物
SD雄性大鼠，體重120～180 g，由中國科學院上海動物實驗中心提供。飼養室溫度18～22℃，相對濕度6o％，每日光照12 h。標準實驗大鼠全價顆粒飼料喂養，自由飲水，大鼠體重達220～250 g時進人實驗。
1．2 藥物和試劑
含有9％脂肪含量的腸內營養乳劑具體配方如下：蛋白質39．8 mg／mL，水解乳清蛋白39．8mg/mL，氮5．8 mg／mL，碳水化合物188 mg／mL，葡萄糖3．6 mg／mL，麥芽糖11 mg／mL，多糖179 mg／mL，乳糖低于2．6 mg／mL，礦物質5．2 mg／mL，維生素0．8mg／mL，有機酸0．2 mg／mIL，能量4．18 kJ／mL；脂肪及植物油10 mg／mL，其中長鏈甘油三酯組(LCT)含有10 mg／mI~長鏈甘油三酯，中長鏈甘油三酯組(MCT／LCT)含有5 mg／mL長鏈甘油三酯，5 mg／mL中鏈甘油三酯(由紐迪希亞公司配制)。各種脂肪酸標準品(Sigma公司，美國)；正己烷、異丙醇(色譜純，Merck公司，德國)。
1．3 儀器
HP 4890D氣相色譜儀，配備火燄離子化檢測器(FID)，HP3398A色譜工作站(美國Agilerlt公司)。
2 方法
2．1 動物模型的建立
2．1．1 短腸大鼠模型的建立 大鼠以氯胺酮100mg／kg麻醉。取腹部正中切VI進腹，沿腸壁的對系膜緣用棉線量取全小腸長度。切除85％ 中段小腸：自Treitz韌帶起量取近端空腸5 em離斷，自回盲部量取遠端回腸10 em離斷，以3-0絲線依次結扎需切除的小腸供應血管，切除小腸，以無菌6-0錦綸線間斷縫合吻合殘存小腸。以醫用硅膠管行胃造口，並通過皮下隧道將其引至背部肩胛間區，固定于背部肩J4~l司區皮膚。再通過一彈簧保護套，與輸液系統連接，形成旋轉輸液裝置，大鼠自由活動。
2．1．2 對照假手術組大鼠的處理 大鼠以氯胺酮100 mg／kg體重麻醉。取腹部正中切口進腹，沿腸壁的對系膜緣用棉線量取全小腸長度。自Treitz韌帶起量取近端空腸5 cm離斷，同“2．1．1”法吻合小腸。
2．2 動物分組及處理
2．2．1 分組 將21只大鼠隨機分為3組，每組7只，分為對照組(Con)，短腸給予長鏈甘油三酯腸內營養組(LCT)和短腸給予長鏈／中鏈甘油三酯腸內營養(MCT／LCT)組。對照組大鼠給予假手術處理，短腸組大鼠給予短腸造模處理。
2．2．2 給藥 自術後第2天起至術後第14天，各組大鼠給予等氮(1．392 g／kg)、等熱量(220kcal／(kg?d))腸內營養乳劑，相當于輸注營養乳劑240mL／kg。以微量輸液泵經胃造VI管24 h持續均勻輸注。術後第2天給予腸內營養1／4量，第3天給予1／2腸內營養量，第4天以後給予全量。對照組和短腸LCT組給予9％長鏈甘油三酯腸內營養，短腸MCT／LCT組給予4．5％ 中鏈甘油三酯和4．5％長鏈甘油三酯的腸內營養。
2．3 檢測指標和方法
2．3．1 體重的測定 每天稱重，觀察體重的變化。每組取平均值，結果以 ±s表示。
2．3．2 標本的留取 術後第15天打開大鼠胸腔，自右心室抽取心髒血，置于試管中，放入離心機中1500 r／min離心15min，吸取上層血清留作脂肪代謝檢測。
2．3．3 脂肪酸的測定 方法見文獻[3]。取血清0．5 mL于5 mL磨口試管中，加1．0 mg／mL正十七碳酸(C17：0)10μL，再加2 mol／L HCI 30 μL，混勻，加入正己烷．異丙醇(4：1)3 mL，震蕩，離心，取上清液2．5 mL，氮氣流下吹至約50μL溶液，2μL進樣。HP．FFAP石英毛細管色譜柱(30 m x 0．32 min ID)，塗層厚0．25 tma；載氣：氮氣(99．999％)；進樣溫度260℃，檢測器溫度：300℃；進樣量：2 。載氣流速103．35 kPa；程序升溫：起始70℃，保持1 min，以10℃／min升溫至130℃ ，保持5 min，以15℃／min升溫至230℃，保持20 min，再以15 ℃／min升溫至250 ℃，保持15 min。考察了18種脂肪酸的含量，具體為：正八碳酸(C8：0)、正十碳酸(CIO：0)、正十二碳酸(C12：0)、正十四碳酸(C14：0)、正十六碳酸(C16：0)、正十八碳酸(C18：0)、十六碳一稀酸ω(C16：lω7)、十八碳一稀酸ω7(C18：1ω7)、十八碳一稀酸ω9(C18：ω9)、十八碳二稀酸ω6(C18：2ω6)、十八碳三稀酸ω3 (C18：3ω3)、二十碳二稀酸ω6(C20：2ω6)、二十碳三稀酸ω6(C20：3ω6)、二十碳四稀酸ω6(C20：4ω6 )、十八碳三稀酸ω3(C18：3ω3)、二十碳五稀酸 (C20：5ω3)、二十二碳五稀酸∞3(C22：5ω3)、二十二碳六稀酸ω3(C22：6ω3)。
2．4 統計分析
結果以  ±s表示，組間差異以獨立樣本t檢驗分析，以P<0．05為統計學差異顯著，以P<0．O1為統計學差異非常顯著。以統計分析軟件SPSS l0．0進行統計分析。
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