康萊特注射液誘發腎癌細胞凋亡及p53、bcl－2表達的研究

　　中國腫瘤臨床1999年第26卷第6期

王俊傑　孫新臣　申文江　俞莉章　于世平

　　 　　摘　要　目的：探討康萊特注射液抗腫瘤的作用機制。方法：利用MTT法分析康萊特對腎癌細胞的抑制作用，末端脫氧核苷酰轉移酶法檢測細胞凋亡，免疫組織化學法分析p53和bcl－2基因表達的影響。結果：康萊特抑制腎癌細胞的IC50為19.31μl/ml。5μl/ml和10μl/ml康萊特注射液具有誘發細胞凋亡的作用，細胞凋亡分別為31.30％和89.76％，康萊特濃度繼續增加時，細胞凋亡的數量反而減少，15μl/ml和20μl/ml組細胞凋亡數量均低于10％。免疫組織化學證明康萊特注射液組p53基因表達標記指數為16.8％，而對照組幾乎沒有表達。對照組bcl－2基因表達標記指數為25％，而10μl/ml康萊特組為6.6％。結論：康萊特注射液抗腫瘤的作用是通過誘發細胞凋亡和引起細胞壞死來實現的，10μl/ml以下濃度主要是通過誘發細胞凋亡，10μl/ml時達最大值，10μl/ml以上劑量時主要是引起細胞壞死。康萊特注射液的抗腫瘤作用可能是通過上調p53基因表達和下調bcl－2基因表達。

　　關鍵詞：康萊特　細胞凋亡　p53　bcl－2

　　康萊特注射液系從中藥薏苡仁中提取的抗腫瘤制劑，藥效學和臨床應用研究結果表明該劑對多種腫瘤具有明顯的抑制作用和確切的療效^[1]，但是有關康萊特注射液抗腫瘤的作用機制目前尚不清楚。本文利用腎癌細胞系探討康萊特注射液抗腫瘤的機制，為臨床腫瘤綜合治療提供理論指導。

　　1　材料與方法

　　1.1　藥物與細胞培養

　　康萊特注射液（10％）和空白乳劑由浙江康萊特藥業有限公司提供（批號93ZL－22）。四氮甲唑藍[3(NULL,5－dimethy1－2－thiazolyl)－2,5－dipheny1－2Htetrazolium hromode,MTT]（美國sigma公司產）。二甲基亞