摘　要：多年來，毒藥理界對機體內多種外來化合物產生的聯合作用缺乏統一評價體系。本文就其已有的理論基礎和相關的方法學成就作一概述，旨在介紹各自的使用範圍和優缺點，提請應用者根據條件選用合適的評價方法。

　　關鍵詞：聯合作用　評價方法

　　工農業迅猛發展，使得地球上化學物數量不斷增加，人類在生產條件或生活環境中同時接觸或相繼暴露兩種及兩種以上化學物已是相當普遍^﹝1﹞。為了能取得較好的治療效果，多藥聯用或序貫用藥又是現代臨床醫學的主導趨勢^﹝2﹞。多種外來化合物共存，勢必對接觸的生物體產生聯合作用(joint　action，combined　action)，亦稱交互作用(interaction)。盡管在藥理學和毒理學中聯合作用分別發生在不同的劑量水平，對聯合作用特征的正確評價仍是兩門學科工作者的當務之急。

　　在不同的時期和不同的學科領域，如生物學、藥理學、生物統計學，聯合作用具有不同的含義，特征術語亟待統一和規範化，對其評價方法也不盡相同^﹝3﹞。Bliss在1939年最早提出獨立、相似和協同三種聯合作用模型^﹝4﹞。1975年Anderson和Weber把Bliss建立模型應用于水生毒物聯合作用研究^﹝5﹞，並引入了濃度相加和反應相加的概念。1981年WHO把聯合作用明確分為四類^﹝6﹞：相加、協同、拮抗和獨立作用，這種分類方法已為多數學者所接受。1988年Rothman等又提出四種不同的聯合作用類型^﹝7﹞：統計學、生物學、公共衛生學和個體判別的聯合作用，不過沒有被普遍應用。

　　對同一組資料應用不同的分析方法會得出不同的結論^﹝2﹞。因而就某組特定的混合物而言，很可能用一種方法計算的結論是相互協同，但用另一種方法計算的結果卻是相互拮抗。關于聯合作用特征的評價，國內外尚未形成統一的認識體系^﹝8，9﹞。

　　1　等效應線圖法

　　1870年Fraser倡導，1926年Loewe加以發展的等效應線圖法^﹝10﹞，是先用加權直線回歸法求出單獨與混合後的LD₅₀，再求其毒性比例TR值，以TR界值來反映結果性質。在試驗條件和接觸途徑相同的情況下，分別求出兩個化學物的LD₅₀及其95％可信限，用縱、橫坐標分別代表兩種化學物的劑量並將取得的同一效應的劑量(LD₅₀)點相連即為等效線，然後再將兩化學物的95％可信限的上、下限值分別連接。依據混合物實測LD₅₀在兩種化學物可信限上、下連線之間位置判定聯合作用的特征。該法簡單，結果直觀，適用于粗略觀察。但是只能評價兩個化學物的聯合作用，與其嚴密的設計相比信息利用度不夠，也不適用于非概率型效應指標資料。

　　Checkerboard titration法就是基于等效應線圖法思想的一個延伸^﹝11﹞，可以從代數和幾何兩個角度加以判斷，Berenbaum同時又將此法推廣到求任意數量藥物的聯合作用。等效應劑量分析會受許多因素的影響，且方法本身往往因為技術上的差錯產生一些差異值，可比性比較差，重復步驟太多。

　　Finney根據Loewe法的劑量比例原則，提出了以各成分LD₅₀為基礎，評價相似聯合作用的調和平均數模型，來確定混合物的預期LD₅₀。由于簡便易行，經多數學者證實能較好地預測和評價聯合毒性。它是在先求出各化學物的各自LD₅₀值，以各化學物的聯合作用是相加作用的假設出發，按等毒效應劑量預測混合化學物的LD₅₀。用與計算預期PLD₅₀時相同配比的混合物作動物實驗，求出實測半數致死量OLD₅₀和混合物的PLD₅₀與OLD₅₀的比值，即聯合作用系數Q，實測值小于預測值為協同作用，反之為拮抗作用。

　　Keplinger等用有機磷、有機氯和氨基甲酸酯等15種農藥^﹝12﹞，按等毒性配比得100多種混合物，分別求得PLD₅₀／OLD₅₀，據此提出了0.57～1.75之間為相加作用的標準。Smyth將27種化學物^﹝13﹞，同樣按等毒性配比，配成350種混合物，進行小鼠聯合毒性試驗，建議按Finney數學模型計算的Q值在0.40～2.70之間屬相加作用。河合正計、岩原滋利曾用此法對8種殺蟲劑和4種殺菌劑配成28個混合物進行測定^﹝14﹞，提出不同的Q值評價標準。

　　採用Finney的Q值評價聯合作用特征^﹝15﹞，因其毒物種類、實驗條件和動物種屬的差異，以及經驗估計範圍的不同而使之缺乏可比性。Abt等人提出以OLD₅₀／PLD₅₀作為Q值，其具體分界線用其建議的計算偏離‘1’的程度公式，然而計算太繁，應用不便。

　　Finney法又在生態毒理學中得到應用和擴展^﹝16﹞，採用等毒性混合法比較預期EC₅₀和實測EC₅₀，由毒性加強指數TEI來評價其特征。Kissinl等提出的分數(代數)分析法^﹝17﹞，基本思路與等效應線圖法類同，但允許A、B兩藥以任意比例合用，適用範圍廣，國內仍在採用。1977年Marking提出的相加指數法是在濃度相加模式基礎上建立的，需要獲得每個單一毒物的LC_50i和在一定比例下幾個毒物混合的LC_50i