血小板因子₄的研究進展

醫學信息1999年3月第12卷第3期

朱柏貴¹ 綜述 楊 嵐² 審校

1江蘇省武警醫院內1科（225001）²第四軍醫大學西京醫院血液科（710032）

　　血小板因子4（PF₄），近幾年已越來越受到人們的重視，是一種新近發現的造血細胞保護性抑制劑。通過先可逆性抑制骨髓造血細胞（尤其是巨核系），繼而達到在化療、放療過程中保護造血細胞的目的。現綜述如下：

　　1 PF₄簡介

　　早在1984年Conley發現血小板減少的患者對肝素的敏感性增高^[1]，認為可能是血小板釋放某種蛋白，中和了肝素的抗凝性。此後被其它學者陸續證實^[2]並稱此蛋白為PF₄。PF₄是巨核細胞（MK）合成的，存在于MK和血小板α顆粒中的特異性穩定蛋白，含有70個氨基酸，由4個單體組成，每個單體分子量為7.8KD^[3]。PF₄屬人趨化因子超家族，C-X-C亞族^[4]，定位于人4號染色體長臂，其cDNA含有一個開放閱讀框架，羧基端含有肝素結合位點。生物活性包括：中和肝素^[5]；刺激白細胞彈性蛋白酶^[6]；趨化中性粒細胞、單核細胞和成纖維細胞^[7]；擬制內皮細胞的增殖、遊走和血管的生成^[8，9]。

　　2 PF₄對造血細胞的影響

　　PF₄早期一直被認為在凝血、炎症和組織修復過程中發揮生理作用^[10-11]。直到80年代初期人們才發現正常人MK集落形成較血小板減少者差。1989年Geirtz在體外實驗中^[12]，將PF₄及其多肽P_47-70與P_58-70加入到骨髓單個核細胞的培養基中，發現PF₄及P_47-70對MK有抑制作用，而對紅系和粒系集落無抑制作用，P_58-70則無此反應。在正常情況下，凝血因子V（FV）僅在成熟的MK有表達。用生物素酰基化cDNA探針原位雜交技術探測FV的mRNA表達，當P_47-70與MK共同孵育時，MK中的FV的mRNA表達減少60%。此後不斷有人報道，PF₄對MK及MK祖細胞的抑制作用，此抑制作用呈濃度依賴性，而且在高濃度時可抑制粒一單系集落形成單位（CFU-GM）、紅系爆式集落形成單位（BFU-E）。

　　1996年Xi等報道^[13]：PF₄使源于臍血CD^+₃₄細胞的MK的集落形成明顯減少，並與PF₄有劑量依賴關系。當這些臍血細胞與PF₄預孵2h，洗滌後放入另一培養基，MK集落的形成的有明顯提高，3d開始上升，7d達到高峰，12d開始下降但仍對照組明顯增高。這些未洗滌的預孵育細胞，經5-氟尿嘧啶（5-FU）處理後，MK集落也顯著升高。Aidoudi s在小鼠體內實驗中^[14]，注射PF₄20h後，再注射5-FU，1週後，高增殖潛能集落細胞、BFU-E、CFU-GM、CFU-MK，MK與單純注射5-FU對照相比，均有顯著升高，白細胞、血小板8～10d開始上升，24～25d恢復正常，血紅蛋白則無變化。PF₄能維持正常骨髓單個核細胞和臍血CD^+₃₄細胞的生長，並能保護其不被細胞毒藥物誘導凋亡，顯著降低對化學藥物的敏感性，使一些細胞毒藥物50%的抑制濃度（CI₅₀）升高。最近研究表明^[16]：PF₄多肽P_34-58較PF₄有更強的造血抑制活性，對CFU-MK、BFU-E、CFU-GM的抑制是相同的，不象PF₄對CFU-MK的作用明顯，且抑制作用大于PF₄的60倍。

　　3 PF₄對骨髓作用的機制

　　PF₄有些作用機制還十分清楚，其受體至今尚未明了。據Lecomte-Raclet l 報導：^[16]PF₄中央區域P_34-58是一個完整的功能區，主要含有DLQ（天門冬氨基酸、亮氨酸、谷氨酰胺）序列，固定在54～64位，當DLQ缺失時抑制活性完全消失，且對肝素缺乏親合性，抑制作用也不被肝素中和。肝素和幾種其它氨基葡聚糖在體內外能刺激MK生成^[17-18]，用肝素激酶和軟骨素處理細胞或通過抑制糖蛋白合成，可抑制MK生長。同樣濃度的氨基葡聚糖不能刺激存在有GM-CSF或IL-3的粒系生長。此可支持PF₄對CFU-MK的作用明顯。同時PF₄通過C端尾部陽離子與細胞表面的氨基葡聚糖，阻止細胞與一些生長因子相互作用，導致細胞增殖的抑制以及引起PF₄自身分子的改變，使得中央部分的功能區易與細胞接觸，最後誘導增殖抑制。人為的切除PF₄的C端與N端與可導致中央功能區完全暴露，產生造血抑制作用。PF₄還可阻止造血細胞進入S期，對已進入S期的細胞能抑制DNA的合成^[19-20]，被其處理的細胞仍然成活但處在相對靜止狀態。這些可說明，PF₄能減少細胞對化學毒劑的敏感性，通過減少細胞毒劑對造血細胞的抑制，而達到保護造血細胞免疫損傷的目的。目前的研究表明了化療藥物對腫瘤細胞的作用是誘導其凋亡。PF₄與正常造血細胞孵化後，再用化療藥物的處理，不僅細胞未受損傷，反而使造血細胞集落顯著上升。但是，當PF₄與人紅白血病細胞株HEL、早幼粒細胞白血病細胞株HL-60共同孵育後，並不能使其集落數上升，這些可進一步說明，PF₄僅對正常造血細胞起保護作用。

參考文獻

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編輯 任鴻蘭

校對時間：99-12-723:11 何娟迎